MET扩增是EGFR TKI耐药的真正机制吗？

在表皮生长因子受体（EGFR）突变非小细胞肺癌（NSCLC）中，间充质上皮细胞转化因子（MET ）拷贝数增加（CNG）被认为是EGFR TKI的获得性耐药机制之一。已有多项临床研究采用MET TKI联合EGFR TKI方案来探索其在克服耐药性方面的作用，但结果不尽人意，为进一步明确MET抑制剂的获益人群，一项研究评估了EGFR突变阳性NSCLC患者中不同MET CNG阈值的临床意义，近期发表在《临床肿瘤学杂志》（Journal of Clinical Oncology）杂志。

研究背景
MET基因突变，例如外显子14跳跃突变和拷贝数增加（CNG），被认为是致癌驱动因素。研究显示，在EGFR突变NSCLC中，MET CNG被认为是EGFR TKI的获得性耐药机制之一。

目前，对于MET阳性的界定尚未达成共识，而研究结果显示，EGFR TKI获得性耐药且MET高表达患者使用联合治疗的疗效也不显著。最近，有病例报告显示，在EGFR突变阳性NSCLC伴MET扩增对厄洛替尼产生原发性耐药的患者中，加用克唑替尼后患者肿瘤缩小，这又说明MET是真正的靶标。

大多数临床试验使用荧光原位杂交（FISH）来鉴定MET驱动基因。该研究也通过FISH评估EGFR突变阳性NSCLC患者中不同MET CNG阈值的临床意义。

研究方法
对200例转移性未经治EGFR突变阳性患者中进行MET荧光原位杂交检测。 MET高表达定义为CNG≥5，另一标准是，MET与7号染色体着丝粒部分的比率≥2。 通过Kaplan-Meier方法评估MET高表达和低表达的患者经EGFR TKI治疗的失败时间（TTF），并使用对数秩检验进行比较。采用多单核苷酸多态性阵列分析研究MET CNG的肿瘤内异质性。

图1. 试验流程图

主要研究结果
转移性EGFR突变阳性NSCLC患者MET高表达发生率和临床特征：
初诊时，发现52例（共200例，26%）的未经治转移性EGFR突变阳性MET高表达（图2）。其中，46例（23％）存在MET多体性，而其余6例（3％）存在MET扩增。在这些患者中，59.6％患者的MET CNG在6~8，只有21.2％患者的MET CNG≥8。在MET扩增患者中，中位MET CNG为7.6，中位MET / CEP7比率为2.3。MET高表达和MET低表达患者的基线临床特征相似，包括年龄、性别、吸烟状况、脑转移和EGFR外显子突变。在EGFR TKI治疗队列中，MET高表达的发生率相似（25.3％，39/514）。69.2％（27/39）的患者接受一代EGFR TKI治疗，而12例（30.8％）接受了二代EGFR TKI治疗，而在MET低表达患者中分别有73例（共115例，63.5％）和42例（共115例，36.5%）接受了一代EGFR和二代EGFR TKI治疗。

图2.MET高表达在未经治EGFR突变NSCLC患者中的发生率

MET高表达患者接受一代EGFR TKI的临床结果
中位随访时间9.6个月时，在MET高表达和低表达组的中位TTF分别为12.2个月和13.1个月。MET高表达和低表达组患者的缓解率（RR）分别为74.4％和53.9％，这表明MET拷贝数＞5并未预示更差的结果（P =0.033，图3A） 。

此外，对于TTF≤6个月的患者，MET拷贝数并没有显著增加，MET高表达和MET低表达分别为38.5％和29.6％（P = 0.303）。按中位6.8分层MET高表达也未发现RR或TTF的差异。在5例MET扩增患者中均观察到对EGFR TKI治疗反应差（图3B、3C）。

图3. MET 高表达患者接受一代EGFR TKI的临床结局

进展后MET表达的变化
第二次数据分析时，一线EGFR TKI上出现疾病进展基线时，39例患者中有29例（74.3％）患者为MET高表达，115例患者中有87例（75.6％）患者为MET低表达。在这些患者中，37例患者接受了组织活检，仅在23例进展后活检样本中确定了MET状态。 其中有4例（共23例，17％）患者为MET高表达，这与之前研究报道的在TKI耐药情况下MET的发生率一致。 初诊时MET高表达的6例患者中，有3例患者的进展后活检结果显示为MET低表达。 而16例MET低表达进展后仍然MET低表达。

总之，初诊时MET高表达通常是亚克隆，并不总是主要的驱动因素，特别是在EGFR突变阳性NSCLC患者中。

MET CNG在早期切除肿瘤中的瘤内异质性
13例肿瘤中有7例（53.8％）在至少1个切片中显示MET CNG。在这7例样本中有6例样本切片显示出MET CNG的差异性，这显示出高度的肿瘤异质性。类似地，在11例（85％）和10例（77％）肿瘤样本的至少一个切片中显示出EGFR和HER2 CNG，分别在8例（共11例）和4例（共10例）样本中观察到拷贝数的瘤内异质性。研究对可用切除样本（n=12/13）的切片进行MET FISH分析，再次证明了MET拷贝数的瘤内异质性（图4）。研究者认为基因特异性CNG可以随机发生，并可能代表基因组的不稳定性，需要更精确的方法来确定MET的激活。

图4. 切除肿瘤的瘤内异质性分析

MET扩增或可作为EGFR TKI原发性耐药的标志物
研究进一步对8例RECIST可评估的EGFR突变阳性NSCLC患者进行分析，该患者的TTF＜6个月，对一线EGFR TKI无应答，2例患者为MET CNG高表达，其中1例患者为MET扩增。这例患者为62岁的从不吸烟女性，存在EGFR L858R突变和MET扩增（拷贝数7.3，比率3.4，ROS1/ALK阴性），在开始厄洛替尼治疗后4周内产生了疾病进展。因无法耐受联合治疗，隔天接受克唑替尼单药治疗，意料之外的是，该患者肺部病灶逐渐消退，因此研究者推测可能是MET驱动的EGFR突变阳性NSCLC。研究者在肿瘤活检样本中成功提取并培养了细胞，在收集的19个单细胞克隆中，均显示了EGFR L858R突变和MET扩增，中位拷贝数为4.8。

讨论和结论
研究显示，通过荧光原位杂交检测发现高达26％的EGFR突变阳性NSCLC存在MET 高表达，但这并不影响对EGFR TKI治疗的应答，而MET扩增的患者除外。该研究初步发现MET扩增或可作为EGFR TKI原发性耐药的标志物。

无论MET拷贝数阈值如何，MET CNG并未预测对EGFR TKI治疗的应答，这可能归因于肿瘤异质性和MET高表达阈值的界定。阐明MET驱动基因的机制需要进一步的研究探索，以确定最有可能从MET抑制剂获益的患者。

谢谢分享，学习了